ELISA實驗測定值與預(yù)期值有偏差咋辦?

　　酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)，簡稱ELISA，它是實驗室常用的檢測方法。酶是能夠催化化學(xué)反應(yīng)的特殊蛋白質(zhì)，其催化效力*人造催化劑，ELISA就是將抗原和抗體的免疫反應(yīng)和酶的催化反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種新技術(shù)。使用酶去標(biāo)記抗原或抗體以后既不影響抗原抗體反應(yīng)的特異性，也不改變酶本身的活性。因此ELISA具有性高、檢測時間短、價格低廉、判斷結(jié)果有客觀標(biāo)準(zhǔn)、結(jié)果便于記錄和保存等優(yōu)點，適合于大批標(biāo)本的檢測，廣泛應(yīng)用于食品安全檢測、醫(yī)療檢測以及免疫實驗分析等領(lǐng)域。

　　很多朋友在做科研實驗之前都會對實驗結(jié)果有一個預(yù)期，但是并不是什么事情都是和自己想象的一樣。自然elisa試劑盒測定值與預(yù)期值相差甚遠(yuǎn)也是常有的事。以至于就會有朋友懷疑ELISA試劑盒是不是有問題？

　　如果您在實驗過程中碰到ELISA試劑盒測定值與預(yù)期值相差太大，那該如何處理呢？

　?。?）生化測定主要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標(biāo)的變化。同時，要測定絕dui值，往往是很可能甚至不可能的。因此，追求的不是絕dui值而是相對值。

　?。?）用不同測定方法和不同測定條件下得到的測定值可能存在很大差異。因此，如果測定方法不同，同一樣品的測定值通常是不可以直接比較的。這也是建議使用試劑盒測定的理由之一。因為不同作者用同一試劑盒測定的數(shù)據(jù)才是可以相互比較的。

　?。?）同一種材料，不同處理、不同發(fā)育狀態(tài)和不同器官其生化指標(biāo)可能發(fā)生很大變化。因此，能夠直接用來比較的文獻(xiàn)資料本來就不多。

　　（4）當(dāng)然，話說回來，測定值如果與文獻(xiàn)報道相差太大，首先應(yīng)該檢查單位是否一致，包括摩爾還是毫摩爾，是干重、鮮重還是蛋白質(zhì)濃度，是分鐘還是秒，等等。其次，檢查計算是否有誤？之后，如果相差不是數(shù)量級，通常是很正常的。