優(yōu)化ELISA的要點(diǎn)之一在于洗刷。洗刷過(guò)程可下降未結(jié)合抗體所引起的布景信號(hào)，從而增加剖析的信噪比。每一步之間的洗刷確保只要特異的結(jié)合事情被保存，在后一步產(chǎn)生信號(hào)。而不充分的洗刷會(huì)導(dǎo)致差異和高布景，從而帶來(lái)不抱負(fù)的成果。本文將為你介紹一些運(yùn)用主動(dòng)洗板機(jī)來(lái)洗刷ELISA平板的技巧。

　　洗刷參數(shù)

　　一些參數(shù)會(huì)影響洗刷過(guò)程的作用。個(gè)首要的參數(shù)是洗刷量。主動(dòng)洗板機(jī)會(huì)分配洗刷液。假如你之前遭遇過(guò)高布景，那么不要猶疑，將洗刷量調(diào)為高，是比包被體積更高。太少的洗刷液會(huì)讓一部分剖析外表洗刷不到，從而明顯增加布景。所有反應(yīng)孔的洗刷量有必要相同。一般來(lái)說(shuō)，洗刷量越高，則孵育過(guò)程殘留的抗體或抗原量就越少。

　　洗刷次數(shù)的經(jīng)歷法則

　　第二個(gè)影響洗刷作用的首要參數(shù)是洗刷循環(huán)的量。當(dāng)然，洗刷次數(shù)越多，布景越低。然而，太多次的洗刷會(huì)下降信號(hào)強(qiáng)度，使其難以測(cè)定。一般的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗刷三次。

　　操控洗刷量和洗刷次數(shù)的另一種方法是參加過(guò)量的洗刷液。一般來(lái)說(shuō)，96孔板的每個(gè)孔能容納330至460 μl。不過(guò)，有些主動(dòng)化洗板機(jī)可設(shè)置程序，分配遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個(gè)量的洗刷液，比方1 ml。它是怎么做到的呢？其實(shí)很簡(jiǎn)單，就是在分液的一起翻開(kāi)吸液功用。換句話說(shuō)，隨著分液器分配更多的液體，抽吸器也將液體吸出。這種技術(shù)能增加洗刷量，但不會(huì)溢出到其他孔中。

　　ELISA看起來(lái)很簡(jiǎn)單，但是在實(shí)際操作過(guò)程中，也不能掉以輕心，還是應(yīng)該仔細(xì)檢查洗刷過(guò)程，才能獲得的成果。